一、细胞基本属性
细胞名称:H4 - II - E - C3细胞
细胞别称:大鼠肝癌细胞系
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
组织来源:化学诱导肝癌组织
生长特性:贴壁生长,形成致密单层
细胞形态:典型上皮样,多角形或梭形
细胞代数:建议使用P3 - P15代(保持遗传稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存
倍增时间:约24 - 36小时(依赖培养条件)
供应限制:仅供科研使用,禁止临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管需37℃水浴快速复苏,离心后重悬接种;培养瓶酒精擦拭后静置2小时再操作。
传代标准:融合度达80% - 90%时传代(通常每2 - 3天一次)。
传代比例:1:3至1:6(建议接种密度1×10^4 cells/cm²)。
消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA,37℃消化1 - 2分钟,显微镜下观察细胞边缘收缩后终止。
注意事项:消化后需完全中和胰酶,避免细胞成团;传代后48小时建议全换液。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90% FBS)。
细胞密度:建议1×10^6 - 5×10^6 cells/mL。
冻存步骤:预冷冻存管梯度降温(4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮储存)。
复苏验证:复苏存活率≥85%;建议通过CCK - 8检测增殖活性(P5代细胞应保持对数生长期特性)。
四、售后服务承诺
重发标准:1.运输温度异常导致细胞死亡(需提供温度记录);2.3天内证实污染(需提供检测报告);3.复苏存活率<85%;4.STR鉴定不符。
不予重发情形:1.收货后超72小时未处理;2.使用非指定培养基或血清;3.反复冻融导致细胞损伤;4.未按规范进行污染排查。