一、细胞基本属性
- 细胞名称：F98npEGFRvIII细胞
- 细胞别称：F98 EGFRvIII突变细胞；大鼠胶质瘤EGFRvIII稳转株
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 组织来源：脑胶质瘤组织（经基因工程改造表达EGFRvIII突变体）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：不规则多边形，可形成致密单层，高表达EGFRvIII时可见伪足延伸
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数，确保基因稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS + 1%青霉素/链霉素+200μg/mL G418筛选维持）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 基因特征：稳定表达EGFRvIII突变体（需定期G418压力维持）
- 供应限制：仅限体外研究，不可用于活体实验或临床用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒表面，置于37℃培养箱静置4小时再换液
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代）
- 传代比例：1:3至1:5（依据实验需求调整接种密度）
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA消化液
- 37℃消化3 - 5分钟，轻柔拍打至细胞脱落，立即加入含血清培养基终止
- 注意事项
- 维持G418筛选浓度防止基因沉默
- 避免频繁换液（EGFRvIII表达对微环境敏感）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 90%基础培养基）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤
- 消化后离心收集细胞，重悬于预冷冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 基因表达验证：Western Blot检测EGFRvIII蛋白表达（建议每3代检测一次）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内证实支原体污染（需第三方检测报告）
- 复苏后存活率低于85%
- STR鉴定或EGFRvIII表达验证不符
- 不予重发情形
- 未按推荐条件维持G418筛选压力
- 使用非指定培养基导致基因表达不稳定
- 细胞培养超过推荐代数（P15）
- 未提供完整复苏操作记录及检测数据
