一、细胞基本属性
- 细胞名称：EVSA - T细胞
- 细胞别称：人乳腺癌细胞系
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：成年女性（供体筛选为乳腺癌组织来源）
- 组织来源：乳腺肿瘤组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白基质）
- 细胞形态：典型上皮样多角形，单层贴壁排列
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数以保证增殖稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640培养基（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖培养密度与营养条件）
- 供应限制：仅限科研用途，禁止用于临床或动物实验。
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基。
- 培养瓶：酒精擦拭表面后静置于培养箱2小时平衡温湿度。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）。
- 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）。
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA，37℃消化3 - 5分钟，显微镜下观察细胞间隙增大后终止。
- 注意事项：
- 避免消化过度（影响细胞膜完整性）；
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO、20% FBS及渗透保护剂）。
- 细胞密度：冻存浓度1×10^6 - 3×10^6 cells/mL。
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，重悬于预冷冻存液；
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存。
- 复苏验证：
- 复苏后存活率≥85%（台盼蓝染色法）；
- 功能验证：CCK - 8检测增殖能力（P8代细胞应维持对数生长期活性）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）；
- 72小时内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）；
- 细胞存活率低于85%（需提供台盼蓝染色图像）；
- STR图谱与数据库不一致。
- 不予重发情形：
- 收货后超72小时未进行复苏操作；
- 使用非指定培养基或添加未经验证的生长因子；
- 多次冻融导致细胞损伤；
- 未按规范进行无菌操作引发污染。
