一、细胞基本属性
- 细胞名称：人皮肤成纤维细胞（Human Dermal Fibroblasts）
- 细胞别称：CCD - 1069Sk；皮肤成纤维细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别明确，供体信息可溯源）
- 组织来源：皮肤真皮层组织
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：长梭形或星形，典型成纤维细胞样伸展
- 细胞代数：P5 - P10（严格监控端粒酶活性与增殖曲线）
- 细胞规格：5×10⁵ cells/T75培养瓶或1mL冻存管（含血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+2mM L - 谷氨酰胺）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：含血清冻存液（10% DMSO+90% FBS），液氮气相长期保存
- 倍增时间：约36 - 48小时（与血清批次及接种密度相关）
- 供应限制：仅用于体外研究，禁止体内移植或诊断试剂开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：表面消毒后直接置于CO₂培养箱，24小时内换液
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（接触抑制明显时需及时传代）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项：
- 避免使用过量胰酶（影响细胞外基质分泌能力）
- 传代后48小时内避免频繁观察（减少物理扰动）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：基础冻存液：70% DMEM+20% FBS+10% DMSO
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化后离心去上清，轻柔重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30min → - 20℃ 2h → - 80℃ 12h → 液氮储存
- 复苏验证：
- 复苏存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：Ⅰ型胶原分泌量检测（P8代细胞应保持正常分泌水平）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度记录异常导致细胞团聚坏死
- 到货72小时内证实真菌/黑胶虫污染
- 细胞复苏后贴壁率低于70%
- 核型分析结果与物种不符
- 不予重发情形：
- 使用非原代培养基进行长期培养
- 未按规范进行胶原包直接接种
- 擅自进行基因编辑导致细胞特性改变
- 超过建议代数（P10）仍要求性能质控
