一、细胞基本属性
细胞名称:C8 - D1A[AstrocytetypeIclone]
细胞别称:小鼠星形胶质细胞克隆株;星形胶质细胞Ⅰ型克隆
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:新生鼠(1 - 3日龄,性别未分化)
组织来源:大脑皮层组织
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:典型星形放射状突起,单层贴壁呈扁平多角形
细胞代数:P5 - P12(推荐使用代数,保障功能稳定性)
细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶或1.2mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:DMEM/F12(含10% FBS+双抗+谷氨酰胺)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:饱和湿度
冻存条件:无血清冻存液(含7% DMSO+葡萄糖保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(受血清批次及传代密度影响)
供应限制:仅用于基础研究,禁止转售或生物医药开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管复苏:37℃水浴轻摇解冻,加入预热培养基离心去冻存液
- 培养瓶运输:直接置于CO₂培养箱静置4小时再观察
传代标准:融合度达90% - 95%(星形突起接触时启动传代)
传代比例:1:3至1:4(建议接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁观察细胞脱落后终止
注意事项:
- 禁止使用机械刮除法(易损伤细胞骨架)
- 传代后需静置24小时再更换培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清星形胶质细胞专用冻存液(含7% DMSO+羟乙基淀粉)
细胞密度:冻存浓度8×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 消化后离心去上清,轻柔重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮气相保存
复苏验证:
- 复苏后48小时内完成GFAP免疫荧光染色(阳性率需≥98%)
- 功能检测:谷氨酸摄取能力测试(P8代内保持≥85%初始活性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 干冰运输全程超温(需提供温度记录仪数据)
2. 到货7日内经PCR证实支原体污染
3. 复苏后活率低于85%(需同步提供台盼蓝染色视频)
4. 核型分析显示非整倍体异常
免责条款:
1. 客户自行更换培养基导致增殖停滞
2. 未使用胶原包被培养器皿引起的贴壁失败
3. 消化时间超限导致的细胞碎片增多
4. 未按规范进行定期支原体检测
(注:本产品需配合星形胶质细胞专用培养基使用,常规内皮细胞培养基可能导致表型丢失)