一、细胞基本属性
1. 细胞名称:小鼠胚胎间充质干细胞(C3H/10T1/2 Clone8)
2. 细胞别称:10T1/2 Clone8;C3H/10T1/2亚克隆细胞
3. 种属来源:小鼠(Mus musculus)
4. 年龄性别:胚胎期(性别未分化)
5. 组织来源:C3H小鼠胚胎间充质组织
6. 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质附着)
7. 细胞形态:成纤维样梭形,单层铺展后呈放射状排列
8. 细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数,确保遗传稳定性)
9. 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
10. 培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS + 1%双抗)
11. 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
13. 倍增时间:~24 - 36小时(受血清浓度及接种密度影响)
14. 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内移植研究
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精擦拭表面后直接置于培养箱平衡
2. 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
3. 传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度2×10^4 cells/cm²)
4. 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含酚红指示剂)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
5. 注意事项
- 消化终止需添加等体积含血清培养基
- 传代后6 - 8小时观察贴壁情况
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:基础培养基+20% FBS+10% DMSO
2. 细胞密度:冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
3. 冻存步骤
- 对数生长期细胞经消化离心后重悬
- 程序降温:4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮长期保存
4. 复苏验证
- 复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:成骨/成脂分化潜能检测(P8代细胞应保持多向分化能力)
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 1.运输温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度曲线)
- 2.到货72小时内证实支原体污染(需提供检测原始数据)
- 3.细胞复苏存活率低于80%
- 4.STR分型与数据库不匹配
2. 不予重发情形
- 1.未按规范进行传代导致细胞老化
- 2.使用非标准培养基影响细胞特性
- 3.液氮保存容器故障导致反复冻融
- 4.实验操作污染未及时反馈