一、细胞基本属性
细胞名称：C2BBe1细胞（人结肠腺癌细胞克隆亚系）
细胞别称：C2BBe1；肠上皮屏障功能模型细胞
种属来源：人（Homo sapiens）
组织来源：结肠腺癌组织（经体外分化形成极化单层上皮）
生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被基质）
细胞形态：单层极化上皮，高表达紧密连接蛋白（ZO - 1/Occludin）
细胞代数：P10 - P20（经多次传代验证屏障功能稳定性）
细胞规格：1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管（含专用冻存液）
培养基：DMEM/F12（含10% FBS+表皮生长因子+氢化可的松）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及营养添加剂），液氮长期保存
功能特性：可形成高电阻值单层（TEER≥500 Ω·cm²），适用于肠道屏障研究
供应限制：仅限体外研究，不可用于体内实验或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理：冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基；培养瓶：75%酒精表面消毒，静置培养箱4小时适应环境
传代标准：细胞融合度达90% - 95%（建议每5 - 7天传代）
传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
消化方法：使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）；37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项：传代后需胶原蛋白包被培养皿以维持极化特性；避免频繁观察导致TEER值波动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清专用冻存液（含10% DMSO+20% FBS）
细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤：消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管；程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮储存
复苏验证：复苏存活率≥85%（台盼蓝染色法）；功能验证：TEER值检测（传代后第3天应≥300 Ω·cm²）
四、售后服务承诺
重发标准：1. 运输过程温度记录异常（需提供物流温度监控截图）；2. 到货72小时内证实微生物污染（需第三方检测报告）；3. 细胞初始存活率＜85%（附台盼蓝染色图像）；4. STR分型与数据库不匹配
不予重发情形：1. 未使用胶原包被导致细胞去极化；2. 自行修改培养基配方影响屏障功能；3. 未按规范检测TEER值导致实验数据异常；4. 细胞培养超过推荐代数（P20）后功能衰退
