一、细胞基本属性
细胞名称:C1498细胞
细胞别称:小鼠急性髓系白血病细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:BALB/c雌性小鼠(供体经病理学确认白血病表型)
组织来源:脾脏白血病浸润组织
生长特性:悬浮生长(可形成松散细胞团)
细胞形态:圆形或类圆形,胞质透亮,核质比高
细胞代数:P5 - P15(建议使用前10代确保表型稳定性)
细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含10% DMSO冻存液)
培养基:RPMI - 1640(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:程序降温冻存液(含胎牛血清及保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约24 - 36小时(与传代密度相关)
供应限制:研究级细胞系,禁止用于人体或转基因生物制备
二、细胞培养操作指南
收货处理:
• 冻存管复苏:37℃水浴轻摇解冻,800rpm离心5分钟后换液重悬
• 培养瓶观察:直接置于倒置显微镜下确认细胞密度与形态
传代标准:细胞密度达1×10⁶ cells/mL(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:5(按实验需求调整接种密度)
换液频率:每48小时补充新鲜培养基(保留1/3原培养液)
注意事项:
• 避免剧烈吹打(防止机械损伤细胞膜)
• 定期检测支原体(建议每3代进行PCR检测)
• 维持浓度不低于2×10⁵ cells/mL(预防自发分化)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:FBS+10% DMSO(现用现配)
细胞密度:冻存浓度5×10⁶ cells/mL(高密度冻存保障复苏率)
冻存步骤:
• 4℃预冷冻存管平衡10分钟
• 程序降温盒 - 80℃过夜后转入液氮气相
复苏验证:
• 复苏后活率≥90%(台盼蓝染色法)
• 功能验证:CD11b表达检测(P8代细胞应维持髓系标志)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度记录异常(需提供物流温度曲线)
2. 到货72小时内证实细菌污染(需提供革兰氏染色证据)
3. 细胞活率低于85%(提供染色视频记录)
4. 基因组STR位点与ATCC数据库不符
不予重发情形:
1. 使用无血清培养基培养超过72小时
2. 未按规范进行梯度复苏操作
3. 超过推荐代数仍要求性能担保
4. 擅自进行基因编辑后出现异常