一、细胞基本属性
NCI - H2030细胞产品简介
NCI - H2030细胞是一种人非小细胞肺癌（NSCLC）来源的贴壁生长细胞系，最初从一名肺腺癌患者的胸腔积液中分离建立。该细胞具有上皮样形态，常用于肿瘤生物学研究、药物敏感性测试及癌症相关分子机制探索。
细胞特性
- NCI - H2030细胞携带KRAS基因突变，与肺癌的发生发展密切相关，适合用于靶向治疗研究或耐药性模型构建。
- 其增殖速率中等，需在含10%胎牛血清的RPMI - 1640培养基中培养，并补充1%双抗（青霉素 - 链霉素）。
- 常规传代比例为1:3至1:4，建议每2 - 3天更换新鲜培养基。
应用领域
1. 癌症机制研究：用于探究肺癌细胞增殖、侵袭、转移及凋亡的分子通路。
2. 药物开发：作为体外模型筛选化疗药物或靶向抑制剂，评估药效与毒性。
3. 基因功能分析：通过基因编辑技术研究特定基因（如KRAS）在肿瘤进展中的作用。
保存与复苏
- 细胞冻存液为含90%胎牛血清与10% DMSO的混合溶液，需长期保存于液氮环境或 - 150℃以下超低温冰箱。
- 复苏时建议快速解冻并立即转移至预温培养基，初期可添加额外血清以提升贴壁效率。
注意事项
1. 操作时需严格遵守无菌规范，避免支原体污染。
2. 传代前确保细胞密度达80% - 90%，消化时间控制在2 - 3分钟内以防止过度损伤。
3. 冻存细胞复苏后可能存在短暂生长延迟，建议持续观察48小时并更换培养基以促进恢复。
本细胞系经STR鉴定确认无误，适用于学术研究与工业开发，提供详尽的培养指南及技术支持。
- 细胞名称：小鼠黑色素瘤细胞（B16 - F0）
- 细胞别称：B16F0；黑色素瘤细胞系
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 来源背景：C57BL/6小鼠皮肤黑色素瘤组织
- 组织来源：黑色素瘤组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖培养表面接触）
- 细胞形态：不规则梭形或多边形，可形成簇状聚集
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数以保证遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含含血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：含血清冻存液（10% DMSO+90% FBS），- 150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 48小时（与接种密度及培养条件相关）
- 供应限制：仅供科学研究使用，不可用于临床或动物体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒表面，直接置于CO₂培养箱平衡2小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代）
- 传代比例：1:3至1:6（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁使细胞脱落
- 注意事项
- 终止消化时需加入等体积含血清培养基
- 传代后6小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：基础培养基+20% FBS+10% DMSO
- 细胞密度：冻存浓度1×10^6 - 5×10^6 cells/mL
- 冻存步骤
- 消化离心后细胞重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：黑色素生成能力检测（P10代内保持特性稳定）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内证实微生物污染（需提供检测证据）
- 细胞复苏存活率低于85%
- 物种鉴定与描述不符
- 不予重发情形
- 未按说明书进行传代导致污染
- 使用无血清培养基造成细胞凋亡
- 液氮保存不当导致冻存管破裂
- 未进行基础检测直接开展基因编辑实验
