一、细胞基本属性
- 细胞名称:人表皮癌细胞(A - 431细胞)
- 细胞别称:A - 431;人表皮样癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:85岁女性(组织来源个体信息)
- 组织来源:表皮组织(源自皮肤鳞状细胞癌)
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞间黏附)
- 细胞形态:上皮样多角形,成簇或片状分布
- 细胞代数:P3 - P10(建议使用代数以确保遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含含血清冻存液)
- 培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%青霉素/链霉素)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO),液氮(-196℃)长期保存
- 倍增时间:约24 - 36小时(受培养密度及传代操作影响)
- 供应限制:仅限科研用途,禁止临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱4小时待细胞贴壁
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含钙镁离子平衡液终止)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞脱落
- 注意事项:
- 避免过度消化(防止膜蛋白损伤)
- 传代后48小时内避免频繁换液
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:含血清冻存液(10% DMSO+90% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:细胞增殖曲线检测(P5代细胞应保持活跃增殖能力)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 1.运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 2.到货3天内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测证据)
- 3.STR鉴定与标准数据不匹配
- 不予重发情形:
- 1.未按规范进行细胞复苏或传代操作
- 2.使用非指定培养基导致生长异常
- 3.冻存管反复冻融或保存条件不当
- 4.未在收货72小时内反馈问题