一、细胞基本属性
细胞名称:人肺癌细胞(A-427)
细胞别称:A427;肺腺癌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年女性(供体临床信息保密)
组织来源:肺腺癌组织
生长特性:贴壁生长(具侵袭性增殖特征)
细胞形态:上皮样,不规则多边形,核质比高
细胞代数:P4 - P10(经STR鉴定确认遗传稳定性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含血清冻存液)
培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相为5% CO₂,温度37℃,湿度95%
冻存条件:含10% DMSO的冻存液,-150℃以下长期保存
倍增时间:约24 - 36小时(受传代密度影响显著)
供应限制:仅限肿瘤学研究,禁止临床或体内应用
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管需37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶经表面消毒后直接置于CO₂培养箱平衡。
传代标准:融合度达80% - 90%时进行(建议每2 - 3天传代)
传代比例:推荐1:3至1:5(接种密度保持3×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟,显微镜下确认细胞边缘卷曲后立即终止。
注意事项:
避免过度消化导致细胞膜损伤,传代后6小时内避免移动培养瓶,确保贴壁稳定性。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:含90%基础培养基+10% DMSO
细胞密度:建议冻存浓度1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
细胞离心后重悬于冻存液,分装至冻存管。采用程序降温:4℃平衡30分钟,-80℃过夜后转入液氮长期保存。
复苏验证:
存活率需达90%以上(台盼蓝染色法),复苏后48小时应恢复典型增殖速率,STR图谱需与原始数据一致。
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内检测出微生物污染(附第三方检测报告)
3. STR位点匹配率低于80%
4. 复苏存活率低于承诺标准
不予重发情形:
1. 使用无血清培养基导致细胞凋亡
2. 未按时传代引发的增殖异常
3. 实验操作污染导致交叉感染
4. 液氮保存设备故障造成的细胞损失