一、细胞基本属性
- 细胞名称:786 - O细胞
- 细胞别称:人肾透明细胞癌细胞;肾癌细胞系
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:成年男性(供体来源为肾透明细胞癌患者)
- 组织来源:肾透明细胞癌组织
- 生长特性:贴壁生长(需胶原包被培养器皿)
- 细胞形态:上皮样,单层贴壁,核质比高,边缘清晰
- 细胞代数:P5 - P15(建议使用前10代内以维持遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO),- 150℃以下长期保存
- 倍增时间:约36 - 48小时(依赖培养基成分与细胞密度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或商业用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精擦拭表面,置于37℃培养箱静置4小时后再换液
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度3×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:
- 避免过度消化导致细胞膜损伤
- 传代后需24小时稳定期再开展实验
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:基础冻存液(含90% FBS+10% DMSO)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化后离心收集细胞,重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:VEGF分泌水平检测(P8代内应维持分泌活性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 72小时内证实支原体污染(需提供第三方检测报告)
- 细胞复苏存活率低于80%(需提供染色照片)
- STR分型与数据库不一致
- 不予重发情形:
- 未按推荐培养基培养导致细胞异常
- 解冻后超过48小时未进行传代处理
- 自行修改冻存条件导致细胞失活
- 未提供完整污染证据链的争议案例