一、细胞基本属性
- 细胞名称:人胰腺癌细胞(Human Pancreatic Carcinoma Cells)
- 细胞别称:HS 766T;胰腺导管腺癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:成年患者(原代细胞来源于胰腺癌转移淋巴结组织)
- 组织来源:胰腺癌转移淋巴结组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胰酶消化传代)
- 细胞形态:上皮样或多角形,核质比高,成片状或簇状增殖
- 细胞代数:P3 - P10(经STR鉴定确保遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12(含10% FBS + 1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存(-196℃)
- 倍增时间:~36 - 48小时(依赖培养密度与血清浓度)
- 供应限制:仅限科研用途,禁止用于临床、药物开发或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基。
- 培养瓶:酒精消毒表面,置于CO₂培养箱静置4小时后再换液。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含酚红指示剂)。
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁至细胞脱落,立即加入含血清培养基终止。
- 注意事项:
- 避免细胞过度融合(可能引发自发分化)。
- 传代后48小时内避免频繁观察,减少环境扰动。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:基础培养基 + 20% FBS + 10% DMSO
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化后离心收集细胞,重悬于冻存液。
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 转移至液氮。
- 复苏验证:
- 复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法)。
- 功能验证:CCK - 8检测增殖曲线(P5代细胞应保持对数生长期特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)。
- 5日内证实支原体/真菌污染(需提供第三方检测报告)。
- 细胞STR位点与数据库不匹配。
- 复苏后存活率低于80%(需提供染色结果及操作视频)。
- 不予重发情形:
- 未按说明书进行预适应培养(如直接更换非推荐培养基)。
- 实验操作污染(未在超净台或未使用无菌试剂)。
- 细胞冻存后未及时转移至液氮(在 - 80℃储存超过1个月)。
- 未进行定期支原体检测导致交叉污染。