一、细胞基本属性
- 细胞名称:人少突胶质细胞(Human Oligodendrocyte Precursor Cells)
- 细胞别称:HMO3.13;少突胶质前体细胞;中枢神经系统胶质细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体无神经系统疾病史)
- 组织来源:脑组织白质区
- 生长特性:贴壁生长(依赖多聚赖氨酸/层粘连蛋白包被)
- 细胞形态:双极或星形分支状,胞体透亮且突起细长
- 细胞代数:P3 - P8(推荐使用代数,确保髓鞘化功能稳定)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:少突胶质细胞专用培养基(含2% B27添加剂+PDGF - AA/FGF - 2生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~72 - 96小时(依赖培养密度与生长因子浓度)
- 供应限制:仅限基础研究,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精擦拭表面后立即转入培养箱静置4小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每5 - 7天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA或Accutase消化液
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 避免机械吹打过度(防止损伤细胞突起结构)
- 首次传代后48小时内避免换液以维持生长因子浓度
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心后重悬细胞于冻存液,分装至冻存管
- 梯度降温程序:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:MBP免疫荧光染色(P5代细胞应表达成熟髓鞘蛋白)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度曲线)
- 到货7天内经检测证实支原体污染(需提供第三方检测报告)
- 复苏后存活率低于85%(需提供台盼蓝染色图像)
- 细胞标志物鉴定与描述不符(需提供流式检测数据)
- 不予重发情形:
- 未使用指定包被培养皿导致细胞贴壁失败
- 自行修改培养基配方影响细胞分化功能
- 未按规范进行梯度降温导致冻存细胞受损
- 实验操作污染导致细胞状态异常