一、细胞基本属性
细胞名称:ZR - 75 - 30人乳腺癌细胞
细胞别称:ZR - 75 - 30;人乳腺癌细胞系;乳腺导管癌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:女性乳腺癌患者(原代供体信息可追溯)
组织来源:乳腺肿瘤组织(浸润性导管癌)
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:上皮样多角形,融合后呈铺路石样排列
细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数,确保表型稳定性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10%FBS+1%双抗+10μg/mL胰岛素)
培养条件:气相:5%CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:程序降温冻存液(含10%DMSO及胎牛血清),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(依赖血清批次及接种密度)
供应限制:仅限于肿瘤机制研究,禁止用于临床治疗或食品开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管复苏:37℃水浴快速解冻后离心去冻存液,重悬于预热培养基;培养瓶运输:酒精擦拭表面后静置2小时,保留原培养基观察24小时
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每周传代2次维持指数生长期)
传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液,37℃消化3 - 5分钟至细胞间隙增大,显微镜下确认80%细胞脱落后立即加入含血清培养基终止
注意事项:胶原酶预处理可提高贴壁效率,传代后需维持胰岛素浓度
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:血清型冻存液(含90%FBS+10%DMSO)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
冻存步骤:离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液,分装至冻存管;梯度降温程序:4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存
复苏验证:存活率≥85%(台盼蓝染色法),复苏后48小时需恢复典型上皮形态
功能验证:雌激素受体表达检测(免疫荧光法确认ERα阳性率>90%)
四、售后服务承诺
重发标准:1.干冰运输期间温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录);2.到货72小时内经PCR证实支原体污染;3.复苏后活率低于协议值(提供台盼蓝染色视频记录)
免责条款:1.客户未按要求进行胶原包被导致贴壁失败;2.使用非指定培养基引发表型改变;3.超代次使用(P15以上)导致的增殖异常;4.未定期进行STR鉴定造成的交叉污染