一、细胞基本属性
- 细胞名称：ZR - 75 - 1+luc人乳腺癌细胞（荧光素酶标记）
- 细胞别称：ZR - 75 - 1 - luc；乳腺癌细胞系（荧光素酶报告基因）
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 组织来源：乳腺导管癌组织
- 基因标记：稳定整合荧光素酶（luciferase）基因
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：上皮样，聚集成簇生长
- 细胞代数：推荐使用P5 - P15代（确保荧光素酶表达稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%双抗+200μg/mL嘌呤霉素）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 荧光检测：需配备D - 荧光素底物及生物发光检测仪
- 供应限制：仅限肿瘤机制研究及药物筛选实验，禁止临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基离心去冻存液
- 培养瓶：75%酒精消毒后直接置于CO₂培养箱
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.02%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打至细胞脱落
- 注意事项：
- 维持嘌呤霉素筛选压力（防止荧光素酶基因丢失）
- 避免频繁传代（超过P20代可能发生基因沉默）
- 定期检测荧光素酶活性（建议每月进行底物发光验证）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+10%海藻糖）
- 细胞密度：冻存浓度5×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化后细胞悬液离心去上清
- 冻存液重悬后分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟→-80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：生物发光强度检测（P10代细胞需≥1×10^4 RLU/μg蛋白）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 液氮运输罐温度记录异常（需提供物流温度曲线）
- 7天内经qPCR证实荧光素酶基因缺失
- 复苏后发光强度低于标准值50%
- 支原体污染检测阳性（需第三方检测报告）
- 不予重发情形：
- 未持续添加嘌呤霉素导致标记丢失
- 使用非透光培养板干扰发光检测
- 未按规范进行胶原酶辅助消化
- 细胞传代次数超过产品说明书范围
