一、细胞基本属性
细胞名称:ZR-75-1人乳腺癌细胞
细胞别称:ZR-75-1细胞;人乳腺癌细胞系
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年女性(源自乳腺导管癌组织)
组织来源:乳腺导管癌组织
生长特性:贴壁生长(需依赖细胞外基质支撑)
细胞形态:上皮样,贴壁后呈多角形或铺路石状排列
细胞代数:P5 - P15(建议控制代数以保证表型稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10%FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5%CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10%DMSO),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与培养密度及传代操作相关)
供应限制:仅限科学研究,禁止临床治疗或生物医药体外诊断
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于新鲜培养基
- 培养瓶:表面消毒后直接置于培养箱,静置24小时再换液
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落,立即加入含血清培养基终止
注意事项:
- 严格控制消化时间(避免细胞碎片增多)
- 传代后48小时内避免频繁观察,减少培养环境波动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:基础培养基+20%FBS+10%DMSO
细胞密度:冻存浓度5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤:
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃30分钟→ - 20℃2小时→ - 80℃过夜→液氮储存
复苏验证:
- 复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:CCK - 8检测增殖曲线(P8代内应保持对数生长期活性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内经qPCR证实支原体污染
3. 复苏后活率低于80%(需提供染色结果及显微照片)
4. STR分型与数据库不匹配
不予重发情形:
1. 未按规范使用无血清冻存液直接冻存
2. 采用非推荐培养基导致细胞形态异常
3. 传代时机械刮取代替酶消化造成物理损伤
4. 未定期进行支原体检测引发交叉污染
(注:以上内容基于标准操作流程,具体实验需结合文献优化参数。)