一、细胞基本属性
细胞名称:人视网膜母血管瘤细胞(Y79 Human Retinoblastoma Cells)
细胞别称:Y79细胞;视网膜母细胞瘤细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:儿童(原代供体确诊为视网膜母细胞瘤)
组织来源:视网膜肿瘤组织
生长特性:贴壁生长(部分呈现半悬浮特性,需定期摇匀)
细胞形态:圆形或卵圆形,聚集生长时呈葡萄串状
细胞代数:P3 - P10(推荐使用代数内以保证表型稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS+1%双抗+10mM HEPES缓冲液)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约48 - 72小时(与细胞密度及培养基新鲜度相关)
供应限制:仅用于肿瘤机制研究,禁止临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
培养瓶:酒精消毒表面,静置4小时后更换新鲜培养基
传代标准:细胞密度达80% - 90%或培养基明显酸化(pH<7.0)
传代比例:1:3至1:4(建议接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
37℃消化3 - 5分钟,离心后轻柔吹散细胞团块
注意事项:
避免过度离心(推荐200×g,3分钟)
传代后48小时内避免频繁移动培养瓶以防半贴壁细胞脱落
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO及胎牛血清替代物)
细胞密度:冻存浓度5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤:
消化后离心收集细胞,预冷冻存液重悬
程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证:
复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
功能验证:N - MYC基因表达检测(P5代细胞应维持肿瘤特性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 收到后72小时内证实微生物污染(需提供污染检测证据)
3. 细胞STR分型与数据库不匹配
4. 复苏存活率低于80%(经我方实验室复测确认)
不予重发情形:
1. 使用非指定培养基或添加未经验证的生长因子
2. 未按规范进行传代导致细胞分化或凋亡
3. 液氮保存设备故障导致细胞反复冻融
4. 未在收到后7日内反馈异常问题
(注:本产品仅供基础研究使用,实验操作需符合生物安全二级实验室规范)