一、细胞基本属性
- 细胞名称:XWLC-05+GFP云南宣威人肺腺癌细胞系+GFP
- 细胞别称:XWLC-05 - GFP;宣威肺腺癌细胞系;GFP标记肺腺癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 疾病背景:源自云南宣威地区肺腺癌患者的原代肿瘤组织
- 组织来源:肺腺癌组织(经病理学确认)
- 生长特性:贴壁生长(需依赖特定细胞外基质)
- 细胞形态:上皮样贴壁细胞,单层铺展后呈不规则多边形
- 细胞代数:P3 - P8(推荐使用P5前代以保证GFP表达稳定性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1%双抗+GFP维持添加剂
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- GFP特性:稳定转染绿色荧光蛋白(激发波长488nm,发射波长507nm)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶:酒精擦拭表面后静置培养箱4小时,待细胞贴壁后换液
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25% Trypsin - EDTA,37℃消化2 - 3分钟,离心后完全去酶
- GFP维护:传代后补充GFP选择性抗生素(如嘌呤霉素),定期荧光显微镜检测表达
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+30% FBS)
- 冻存密度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:细胞消化离心后重悬于冻存液,程序降温:4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮储存
- 复苏验证:存活率≥85%(台盼蓝染色法);GFP荧光强度检测(流式细胞术确认表达率≥90%)
四、售后服务承诺
- 重发标准:1. 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录);2. 72小时内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测证据);3. GFP表达率低于80%(需流式检测报告);4. 细胞STR鉴定与存档数据不符
- 不予重发情形:1. 未使用指定培养基导致GFP表达丢失;2. 未按规范添加选择性抗生素;3. 反复冻融或长期传代(超过P10)导致遗传漂变;4. 未提供污染或功能验证的完整实验记录
备注:本产品需在生物安全二级实验室操作,实验废弃物按生物危害物处理。