一、细胞基本属性
- 细胞名称：XWLC - 05云南宣威人肺腺癌细胞系
- 细胞别称：宣威肺腺癌细胞系；XWLC - 05；肺腺癌上皮细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：成年患者（来源个体经临床诊断为肺腺癌，无其他器官转移史）
- 组织来源：肺腺癌组织（取自云南宣威地区患者原发病灶）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：上皮样多角形，细胞间连接紧密，核质比偏高
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用中低代次以保证遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含胎牛血清冻存液）
- 培养基：RPMI 1640培养基（含10% FBS+1%青霉素/链霉素+1%谷氨酰胺）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：含10% DMSO的胎牛血清冻存液，-150℃液氮长期保存
- 倍增时间：约48 - 60小时（受血清浓度及传代密度影响）
- 供应限制：仅限于癌症机制研究及药物筛选，禁止用于临床治疗或转基因实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴解冻后离心去冻存液，加5mL预热培养基重悬
- 培养瓶：酒精消毒表面，直接置于CO₂培养箱平衡4小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项
- 消化终止需立即加入含血清培养基
- 传代后48小时内避免频繁观察以防污染
- 建议定期检测EGFR/KRAS基因突变状态
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：90%胎牛血清+10% DMSO
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔混悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期储存
- 复苏验证
- 复苏后48小时存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 增殖能力验证：72小时内应形成明显克隆团
- 特异性标志物检测：TTF - 1及Napsin A表达阳性
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 到货7日内证实支原体污染（需第三方检测报告）
- STR分型与存档数据不一致
- 复苏后存活率低于80%（按规范操作前提下）
- 不予重发情形
- 使用非指定培养基或未进行胶原包被
- 未按规范进行传代导致细胞老化
- 实验污染未及时反馈（超过14天）
- 自行改造细胞后功能异常
