一、细胞基本属性
细胞名称：人黑素瘤细胞（WM-115 Human Melanoma Cells）
细胞别称：WM - 115细胞；皮肤黑素瘤细胞
种属来源：人（Homo sapiens）
年龄性别：女性，75岁（原发性皮肤黑素瘤患者）
组织来源：皮肤黑素瘤组织（原发灶）
生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
细胞形态：上皮样与梭形混合，核质比高，可见黑色素颗粒
细胞代数：P3 - P10（推荐使用代数内维持肿瘤特性稳定性）
细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：RPMI 1640 + 10% FBS + 1%青霉素/链霉素
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
倍增时间：~36 - 48小时（依赖培养基成分及接种密度）
供应限制：仅限肿瘤机制研究及药物筛选用途，禁止临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于5mL预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒外壁，静置培养箱4小时再换液
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（贴壁紧密时需及时传代）
传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10^4 cells/cm²）
消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含0.02%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项：
- 黑色素颗粒可能影响显微镜观察，需调整光源强度
- 传代后48小时内避免频繁观察，减少环境扰动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：基础培养基 + 20% FBS + 10% DMSO
细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤：
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证：
- 复苏存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：Transwell侵袭实验（P5代细胞侵袭率需≥对照组）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 干冰运输期间温度＞ - 130℃（需提供温度记录仪数据）
2. 到货72小时内证实微生物污染（需第三方检测报告）
3. 细胞STR谱与ATCC数据库匹配度＜85%
4. 复苏后贴壁率＜70%（规范操作前提下）
不予重发情形：
1. 使用非推荐消化酶导致细胞膜损伤
2. 未按时传代致细胞过度老化（代次＞P10）
3. 实验性基因编辑后细胞功能异常
4. 未提供污染争议的完整培养过程记录
