一、细胞基本属性
细胞名称
WERI - RB - 1人视网膜神经胶质瘤细胞
细胞别称
WERI - RB1;视网膜母细胞瘤细胞系
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
儿童患者(原代取材自视网膜母细胞瘤病例)
组织来源
视网膜肿瘤组织(神经外胚层起源)
生长特性
贴壁生长(需适当基质支持)
细胞形态
多角形至梭形,细胞间连接紧密,核质比高
细胞代数
P5 - P15(建议控制传代次数以维持肿瘤特性)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间
约48 - 72小时(依赖培养密度及血清浓度)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
培养瓶:酒精擦拭表面后静置培养箱2小时,待细胞贴壁后换液
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(通常每3 - 5天传代一次)
传代比例
1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
使用0.25% Trypsin - EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟,轻柔吹打终止
注意事项
避免频繁观察扰动细胞 肿瘤细胞对机械刺激敏感
传代后48小时内避免换液以确保贴壁稳定性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及营养添加剂)
细胞密度
冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
离心收集细胞后重悬于冻存液,分装至冻存管
梯度降温程序:4℃ 30分钟 → - 20℃ 2小时 → - 80℃过夜 → 液氮储存
复苏验证
复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
功能验证:N - myc基因表达检测(P8代内需维持肿瘤相关标记物)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度异常导致细胞死亡
2. 72小时内证实真菌/细菌污染
3. 复苏后存活率低于85%(按规范操作前提下)
4. STR分型与数据库不符
不予重发情形
1. 未按标准流程进行细胞复苏
2. 使用非指定培养基导致细胞分化或死亡
3. 未定期检测支原体引发交叉污染
4. 超过推荐代数(P15)后出现的功能异常