一、细胞基本属性
- 细胞名称:VCAP人前列腺癌细胞
- 细胞别称:VCaP;前列腺癌细胞系;激素敏感性前列腺癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:成年男性(源自激素难治性前列腺癌患者骨转移组织)
- 组织来源:脊椎转移灶前列腺癌组织
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:上皮样多角形,核质比高,成簇生长
- 细胞代数:P5 - P10(建议传代不超过15代以维持功能特性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS + 2mM L - 谷氨酰胺+1mM丙酮酸钠)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约36 - 48小时(依赖培养密度及传代处理)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或生物医药产品开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基离心去冻存液后重悬接种
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱4小时待细胞贴壁后换液
- 传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 避免机械吹打过度(防止细胞团块破碎)
- 传代后48小时内避免频繁观察(确保稳定贴壁)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO + 20% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化收集细胞,预冷冻存液重悬后分装冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃ 过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥85%)
- 功能验证:PSA分泌量检测(P8代细胞应维持雄激素响应特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度记录异常(需提供温度追踪报告)
- 到货72小时内证实支原体污染(需提供电镜检测结果)
- 细胞复苏存活率低于80%(需提供染色照片及操作视频)
- STR分型与数据库记录不符
- 不予重发情形:
- 使用非推荐包被材料导致贴壁失败
- 未按时换液引发培养基酸化
- 擅自添加生长因子改变培养体系
- 超过建议代数仍要求功能一致性