一、细胞基本属性
- 细胞名称：U87MG+RFP人脑星形胶质母细胞瘤（红色荧光蛋白标记）
- 细胞别称：U87MG - RFP；胶质母细胞瘤 - RFP；GBM - RFP
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 病理特征：胶质母细胞瘤（WHO IV级），携带稳定整合的RFP荧光标记
- 组织来源：脑组织星形胶质细胞恶性转化
- 生长特性：贴壁生长（高侵袭性，无接触抑制）
- 细胞形态：不规则梭形或多极星形，胞质丰富，RFP荧光信号均匀
- 细胞代数：P5 - P15（建议使用P8代以内维持标记稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%双抗+0.5mg/mL G418筛选）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO），-150℃液氮长期保存
- 荧光特性：RFP激发波长558nm/发射波长583nm（建议使用TRITC滤片观察）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内移植实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管需37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基；培养瓶经酒精擦拭后静置2小时平衡温湿度。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）。
- 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）。
- 消化方法：使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA，37℃消化2 - 3分钟，显微镜下观察细胞边缘脱离后立即终止。
- 注意事项：传代后48小时内避免荧光检测（确保RFP表达恢复）；定期G418压力筛选防止标记丢失。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+20% FBS）。
- 冻存密度：1×10^6 - 2×10^6 cells/mL。
- 冻存步骤：离心收集细胞后重悬于冻存液，分装至冻存管，程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
- 复苏验证：荧光显微镜确认RFP标记完整性；CCK - 8检测24小时增殖活性（存活率≥90%）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程干冰耗尽导致细胞失活（需提供温度记录证明）；
- 到货72小时内证实支原体污染（需提供第三方检测报告）；
- RFP荧光丢失率＞10%（流式细胞术检测）；
- STR分型与数据库不匹配。
- 免责情形：
- 未按规范进行G418筛选导致标记丢失；
- 使用非推荐培养条件致细胞形态异常；
- 反复冻融导致荧光信号衰减；
- 未定期检测支原体引发交叉污染。
