一、细胞基本属性
- 细胞名称:人脑星形胶质母细胞瘤细胞(U87MG),别称:U - 87 MG、胶质母细胞瘤细胞、GBM细胞。
- 种属来源:人(Homo sapiens),来自成年患者(年龄性别保密,经病理确诊为星形胶质母细胞瘤)的大脑颞叶星形胶质母细胞瘤组织。
- 生长特性:贴壁生长(需细胞培养表面包被支持),细胞形态为不规则梭形或星形,核质比高,可见伪足延伸。
- 细胞代数:P3 - P10(建议使用此代数范围内细胞确保表型稳定性)。
- 细胞规格:1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含含血清冻存液)。
- 培养基:MEM或DMEM基础培养基(含10%FBS+1%非必需氨基酸+1%丙酮酸钠)。
- 培养条件:气相5%CO₂、温度37℃、湿度95%。
- 冻存条件:含血清冻存液(含10%DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存。
- 倍增时间:约24 - 36小时(依赖培养基成分及传代密度)。
- 供应限制:仅供肿瘤机制研究及药物筛选,禁止临床治疗或体内移植。
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管需37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶收货后酒精擦拭表面,静置2小时后观察贴壁状态。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每2 - 3天传代一次)。
- 传代比例:1:3至1:6(建议接种密度3×10^4 cells/cm²)。
- 消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA,37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落,镜下确认细胞完全脱离后终止消化。
- 注意事项:避免消化过度导致细胞膜损伤,传代后12小时建议全量换液以去除细胞碎片。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:含血清冻存液(含10%DMSO+20%FBS+基础培养基)。
- 细胞密度:冻存浓度1×10^6 - 5×10^6 cells/mL。
- 冻存步骤:离心收集对数生长期细胞,重悬于冻存液后分装至冻存管,程序降温:4℃30分钟→ - 20℃2小时→ - 80℃过夜→液氮长期储存。
- 复苏验证:复苏后48小时进行台盼蓝染色(存活率≥90%),建议通过CCK - 8法检测增殖活性,STR鉴定结果需与数据库完全匹配。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 物流温度异常导致细胞死亡(需提供运输温度记录证明)。
- 到货72小时内经qPCR证实支原体污染。
- 细胞复苏存活率低于85%。
- STR分型与ATCC标准谱系不符。
- 不予重发情形:
- 未按规范进行预贴壁处理导致细胞丢失。
- 使用无血清培养基或自行修改培养体系。
- 未定期进行支原体检测引发交叉污染。
- 实验操作失误导致细胞特性改变(如长期过载传代)。
(注:本产品需符合《人间传染的病原微生物名录》生物安全要求,实验操作应在BSL - 2级实验室进行)