一、细胞基本属性
细胞名称：U251 MG (KO)人类星形胶质细胞瘤细胞
细胞别称：U251 KO细胞、星形胶质细胞瘤基因敲除模型
种属来源：人（Homo sapiens）
遗传背景：经基因编辑技术敲除特定靶基因
组织来源：脑星形胶质细胞瘤组织
生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质及生长因子）
细胞形态：不规则星形或多极形态，贴壁后呈单层增殖
细胞代数：P15 - P25（经STR鉴定确认遗传稳定性）
细胞规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%双抗+特定筛选抗生素）
培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间：~24 - 48小时（依赖培养条件及基因敲除特性）
供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
培养瓶：酒精擦拭表面，静置培养箱1小时平衡后更换新鲜培养基
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
传代比例：1:3至1:6（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
消化方法：
使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
37℃消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落，立即加入含血清培养基终止
注意事项：
避免消化过度（影响细胞膜完整性及基因表达）
传代后12 - 16小时观察贴壁情况，及时更换培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+90%基础培养基）
细胞密度：1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
离心收集细胞，重悬于预冷冻存液
程序降温：4℃ 30min → -80℃ 24h → 液氮长期保存
复苏验证：
复苏后存活率≥90%（台盼蓝染色法）
基因敲除稳定性检测：Western Blot或qPCR验证靶蛋白表达缺失
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
2. 72小时内证实微生物污染（需提供检测报告）
3. 复苏存活率低于85%
4. STR分型与数据库不匹配
不予重发情形：
1. 细胞复苏后超72小时未进行传代或冻存
2. 使用非推荐培养基或未添加筛选抗生素
3. 未按规范进行基因表达验证导致实验偏差
4. 反复冻融或机械损伤引起的细胞状态异常
（注：操作前请查阅相关文献并严格遵循实验室生物安全规范）
