一、细胞基本属性
- 细胞名称：人成骨肉瘤细胞（Human Osteosarcoma Cells）
- 细胞别称：U - 2 OS；骨肉瘤细胞；成骨肉瘤细胞系
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 组织来源：骨肉瘤组织（原代取材自15岁女性患者胫骨）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原包被培养器皿）
- 细胞形态：长梭形或多角形，核质比高，贴壁伸展后可见伪足
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数以确保遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：McCoy's 5A培养基（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 36小时（与血清浓度及接种密度相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或商业用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基；培养瓶：酒精消毒表面，静置培养箱4小时后再观察
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:6（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液，37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞间隙增大后立即终止消化
- 注意事项：避免消化时间过长导致细胞膜损伤，传代后需稳定12小时再进行后续实验
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及20% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤：消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管；程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：复苏后48小时内检测细胞贴壁率（应≥85%），功能验证：CCK - 8增殖实验（P10代细胞应保持对数生长期活性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：1. 干冰运输超时导致细胞活性丧失（需提供物流温度记录）；2. 7天内经检测证实支原体污染（需提供检测报告）；3. 细胞复苏后贴壁率低于80%（需提供显微图像）；4. STR分型与数据库记录不符
- 不予重发情形：1. 客户自行修改培养基配方导致细胞状态异常；2. 未按规范进行传代操作（如过度消化或接种密度过低）；3. 液氮保存设备故障导致的细胞失活；4. 实验污染未及时反馈（超过收货72小时）
