一、细胞基本属性
- 细胞名称：T47D人乳腺导管癌细胞
- 细胞别称：T47D细胞系；乳腺导管癌细胞系
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：54岁女性（供体为乳腺癌患者胸腔积液来源）
- 组织来源：浸润性乳腺导管癌组织
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：上皮样细胞，呈铺路石样紧密排列
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数，确保激素受体表达稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管（含胎牛血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640培养基（含10% FBS+1%胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：胎牛血清冻存液（含10% DMSO），液氮气相长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖雌激素刺激条件）
- 供应限制：仅限肿瘤学研究，不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基。
- 培养瓶：酒精消毒后立即置于CO₂培养箱，静置24小时再换液。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（贴壁紧密时需及时传代）
- 传代比例：1:3至1:6（建议接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.02% EDTA）。
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落。
- 注意事项：
- 避免频繁传代（可能导致ER/PR受体表达丢失）。
- 传代后48小时内避免换液以维持细胞贴壁。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：90%胎牛血清+10% DMSO
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集对数期细胞，轻柔重悬于冻存液。
- 程序降温：4℃ 1h → -80℃ 过夜→液氮长期储存。
- 复苏验证：
- 复苏后存活率≥85%（台盼蓝染色法）。
- 功能验证：ERα免疫荧光染色（P10代内应保持阳性表达）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 液氮运输罐温度记录异常（需提供物流温度监控证明）。
- 到货7天内经qPCR证实支原体污染。
- 细胞复苏后ER/PR受体表达缺失（需提供流式检测数据）。
- 不予重发情形：
- 使用含酚红培养基干扰激素敏感性实验。
- 未按规范进行胶原包培养导致贴壁失败。
- 长期传代超过P20导致基因表达漂移。
- 未定期进行STR鉴定导致交叉污染。
