一、细胞基本属性
细胞名称:人淋巴母细胞(Human Lymphoblastoid Cells)
细胞别称:T2细胞;174xcem.T2细胞;EB病毒转化B淋巴细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康供体(年龄及性别信息保密,经EB病毒转化永生化)
组织来源:外周血B淋巴细胞(EB病毒转化建立永生化细胞系)
生长特性:悬浮聚团生长(依赖细胞密度与营养供给)
细胞形态:圆形或类圆形,单细胞或松散聚集体,折光性较强
细胞代数:P10 - P25(保持遗传稳定性与增殖活性)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS + 1%双抗+2mM L - 谷氨酰胺)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(依赖培养基补充因子与传代密度)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
培养瓶:直接转移至培养箱静置30分钟,轻柔混匀悬浮细胞
传代标准:细胞密度达1×10^6 - 2×10^6 cells/mL(通常每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度2×10^5 cells/mL)
操作方法:
直接离心收集细胞,无需酶消化
重悬于新鲜培养基调整至目标密度
注意事项:
避免过度离心(建议200×g离心5分钟)
维持细胞密度不低于5×10^5 cells/mL以防自发凋亡
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及营养保护剂)
细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤:
离心收集细胞,轻柔重悬于预冷冻存液
分装至冻存管后直接转入程序降温盒( - 80℃过夜后移入液氮)
复苏验证:
复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥90%)
功能验证:细胞增殖曲线检测(P15代细胞应维持对数生长期特性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度失控导致细胞死亡(需提供液氮罐温度记录)
2. 3天内证实支原体/细菌污染(需提供电镜或PCR检测证据)
3. 细胞活力低于85%(台盼蓝染色法)
4. STR位点与数据库记录不符
不予重发情形:
1. 客户延迟处理超过48小时(悬浮细胞对复苏时效敏感)
2. 使用非悬浮培养体系导致细胞贴壁或聚集异常
3. 未定期检测支原体导致交叉污染
4. 自行改造细胞后功能异常