一、细胞基本属性
- 细胞名称：SW620/5FU人结直肠癌细胞氟尿嘧啶耐药株
- 细胞别称：5FU耐药株；结直肠癌耐药细胞；SW620耐药亚系
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：结直肠癌患者（性别不限，供体筛选符合伦理规范）
- 组织来源：结直肠腺癌组织（经氟尿嘧啶耐药诱导筛选）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原包被培养器皿）
- 细胞形态：上皮样不规则铺展，耐药株呈现核质比增高及伪足延伸特征
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数，维持耐药基因稳定性）
- 细胞规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含血清型冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640（含10% FBS + 1%双抗+ 200μM氟尿嘧啶维持浓度）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：血清型冻存液（含DMSO及能量代谢保护剂），液氮长期保存
- 倍增时间：~36 - 48小时（耐药株增殖速率较亲本细胞减缓约20%）
- 供应限制：仅限肿瘤耐药机制研究，不可用于药物开发或临床治疗
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于含药培养基
- 培养瓶：表面消毒后直接置于培养箱，24小时内更换新鲜含药培养基
- 传代标准：细胞融合度达70% - 80%（耐药株接触抑制减弱）
- 传代比例：1:3至1:4（建议接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺缓冲液）
- 37℃消化3 - 5分钟，离心后需彻底中和胰酶
- 注意事项：
- 每代培养需维持200μM氟尿嘧啶浓度防止耐药性衰减
- 传代后48小时内避免药物处理以保障细胞贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：90%完全培养基+10% DMSO（含谷氨酰胺增强剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁶-1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化后离心去上清，预冷冻存液重悬
- 程序降温：4℃ 30min→ - 80℃ 24h→液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后72小时内检测IC50值（需达到亲本细胞10倍以上）
- 耐药标记物检测：TS酶活性测定或FPGS基因表达验证
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 细胞复苏后耐药性丧失（需提供IC50检测数据）
- STR谱系与亲本SW620匹配度＜95%
- 支原体污染经第三方检测确认
- 到货时活率＜85%（需提供台盼蓝染色图像）
- 不予重发情形：
- 未按说明维持氟尿嘧啶药物浓度导致耐药性丢失
- 使用非指定培养基超过两个传代周期
- 未进行定期耐药性验证导致实验结论偏差
- 液氮贮存设备故障引发的细胞失活
