一、细胞基本属性
细胞名称 :SW - 13人肾上腺皮质小细胞癌细胞
细胞别称 :SW - 13细胞;肾上腺皮质癌小细胞亚型
种属来源 :人(Homo sapiens)
组织来源 :肾上腺皮质癌组织(小细胞型)
生长特性 :贴壁生长(需胶原包被培养器皿)
细胞形态 :不规则多边形或梭形,细胞间连接松散,核质比高
细胞代数 :P15 - P25(建议使用代数内以保证肿瘤特性稳定)
细胞规格 :1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基 :Leibovitz's L - 15培养基(含10% FBS + 2mM L - 谷氨酰胺)
培养条件 :气相:100%空气(无需CO₂);温度:37℃;湿度:95%
冻存条件 :无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间 :约36 - 48小时(受血清浓度及接种密度影响)
供应限制 :仅限肿瘤机制研究,禁止临床治疗或转基因实验
二、细胞培养操作指南
收货处理 :
·冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬接种
·培养瓶:酒精消毒后直接置于37℃培养箱,4小时后换液
传代标准 :细胞融合度达80% - 90%(贴壁稳定性较低,避免过度生长)
传代比例 :1:3至1:5(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法 :
·使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
·37℃消化3 - 5分钟,机械吹打辅助分离
注意事项 :
·培养基需预热至室温,避免温度骤变引起细胞脱落
·传代后12小时观察贴壁情况,及时补加生长因子
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方 :含20% FBS的L - 15培养基+ 10% DMSO
细胞密度 :冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
冻存步骤 :
·消化后离心收集细胞,重悬于冻存液
·直接转移至程序降温盒(- 1℃/min),- 80℃过夜后入液氮
复苏验证 :
·复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
·功能验证:NSE分泌检测(P20代细胞应保持神经内分泌特性)
四、售后服务承诺
重发标准 :
1.物流温度记录异常导致细胞团块解体(需提供运输温度曲线)
2.72小时内证实交叉污染(需STR检测报告)
3.复苏后贴壁率低于70%(需提供明场照片)
不予重发情形 :
1.使用非指定培养基导致细胞去分化
2.未按规范进行胶原包被引发悬浮死亡
3.未定期进行支原体检测造成实验室污染扩散
4.超过推荐代数仍继续传代导致遗传变异