一、细胞基本属性
细胞名称:SU - DHL - 4人B淋巴瘤细胞
细胞别称:弥漫大B细胞淋巴瘤细胞;Burkitt样淋巴瘤细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
疾病背景:来源于B淋巴细胞恶性肿瘤患者(组织分型为活化B细胞样亚型)
组织来源:淋巴结或外周血(经EB病毒转化)
生长特性:悬浮聚团生长(部分贴壁依赖性亚群需轻微离心辅助)
细胞形态:圆形或椭圆形,胞体透亮,成簇悬浮
细胞代数:P5 - P15(推荐使用中低代数维持表型稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
培养基:RPMI 1640+10%胎牛血清+1%双抗
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:胎牛血清冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存
增殖特性:倍增时间约36 - 48小时(需定期检测MYC基因表达稳定性)
应用限制:仅限肿瘤机制研究或药物筛选,禁止临床移植
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴解冻后直接转移至15mL离心管,加5mL培养基离心去冻存液
培养瓶:静置培养箱4小时避免震荡,离心去除悬浮碎片后换液
传代标准:细胞密度达1×10^6 cells/mL或培养基明显酸化(pH<6.8)
传代比例:1:3至1:4(维持密度2×10^5 - 5×10^5 cells/mL)
操作方法:离心1000rpm 5分钟收集细胞,重悬于新鲜培养基
注意事项:
避免频繁换液(维持必要生长因子浓度)
定期检测支原体(推荐每3代进行一次PCR检测)
培养瓶预留10%条件培养基以促进增殖
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:90%胎牛血清+10% DMSO
冻存密度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤:离心后去上清,缓慢滴加冻存液重悬,程序降温盒分阶段冻存(4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮储存)
复苏验证:
存活率≥85%(台盼蓝染色法)
功能性验证:CCK - 8检测72小时增殖曲线应符合标准斜率
STR备案:提供16位点STR鉴定图谱(匹配ATCC数据库)
四、售后服务承诺
重发条款:
1. 干冰运输全程超-70℃仍出现细胞团溶解(需提供溶胞显微图像)
2. 7日内经qPCR证实支原体污染
3. STR位点匹配率低于85%
免责情形:
1. 使用含β - 巯基乙醇的培养基导致细胞凋亡
2. 未按规范离心致贴壁亚群丢失
3. 长期传代超过P15代出现基因漂移
4. 未定期检测BCL - 2/IgH融合基因导致表型改变