一、细胞基本属性
细胞名称
Snu-182人肝癌细胞
细胞别称
SNU-182；人肝癌细胞系
种属来源
人（Homo sapiens）
年龄性别
成年男性肝癌患者（原代取材于韩国肝癌组织样本）
组织来源
原发性肝癌组织
生长特性
贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
细胞形态
上皮样细胞，核质比高，单层铺展呈不规则多边形
细胞代数
P5 - P15（推荐使用代数保障增殖活性与表型稳定性）
细胞规格
5×10⁵ cells/T25培养瓶或1.2mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基
RPMI - 1640（含10% FBS + 1%双抗+10mM HEPES缓冲液）
培养条件
气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含8% DMSO及胎牛血清替代物），液氮气相长期保存
倍增时间
约36 - 48小时（与血清批次及接种密度相关）
供应限制
仅限肿瘤机制研究，禁止用于体内实验或商业转化
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管：37℃水浴轻摇解冻，1200rpm离心5分钟后重悬接种
培养瓶：酒精消毒外壁，静置4小时待细胞贴壁后换液
传代标准
融合度达80% - 90%（高密度易引发自发分化）
传代比例
1:3至1:6（依据实验需求调整，最低接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法
使用0.25%胰酶 - 0.53mM EDTA溶液
37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
终止消化时需加入等体积含血清培养基
传代后12小时观察贴壁情况，48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
基础培养基:无血清冻存液=1:1（含终浓度7% DMSO + 2%海藻糖）
细胞密度
冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
冻存步骤
对数生长期细胞经消化离心后分装至冻存管
程序降温：4℃平衡30分钟 → 异丙醇冻存盒 - 80℃过夜 → 液氮储存
复苏验证
复苏后12小时检测贴壁率（应≥85%）
功能验证：CCK - 8法检测48小时增殖曲线（P10代细胞倍增时间波动需≤15%）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度记录仪显示≥ - 130℃持续超30分钟
2. 到货72小时内经qPCR证实真菌/支原体污染
3. 复苏后活率低于85%（需提供台盼蓝染色视频）
4. STR分型与ATCC数据库偏差≥2个位点
不予重发情形
1. 未使用胶原包被培养皿导致贴壁失败
2. 擅自添加EGF等生长因子改变细胞特性
3. 未按规范进行胰酶中和引发膜损伤
4. 液氮保存超5年未复检直接使用
