一、细胞基本属性
- 细胞名称:SMMC - 7721人肝癌细胞
- 细胞别称:SMMC7721;肝癌细胞系
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 背景信息:源自52岁男性肝癌患者手术切除的肝癌组织
- 组织来源:肝脏肿瘤组织
- 生长特性:贴壁生长(需依赖特定细胞外基质)
- 细胞形态:上皮样,单层贴壁,可形成致密簇状结构
- 细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数,确保遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(依赖培养条件与传代密度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基离心去冻存液后重悬接种。培养瓶:酒精擦拭表面后直接置于培养箱平衡2小时再换液。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)。
- 传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)。
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液,37℃消化1 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止。
- 注意事项:避免消化过度导致细胞膜损伤,传代后6小时内勿移动培养瓶以促进贴壁。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:基础培养基+10% DMSO+20% FBS。
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤:离心收集细胞后重悬于冻存液,分装至冻存管,程序降温盒转移至-80℃过夜后入液氮。
- 复苏验证:复苏后48小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥85%),并通过CCK - 8验证增殖活性。
四、售后服务承诺
- 重发标准:1. 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录证明)。2. 到货72小时内经检测证实支原体/真菌污染(需提供第三方检测报告)。3. 细胞STR分型与数据库不匹配。
- 不予重发情形:1. 客户未按规范进行复苏前培养基预平衡。2. 使用非推荐培养基或添加剂导致细胞异常。3. 未定期进行支原体检测造成实验室污染扩散。