一、细胞基本属性
细胞名称:人肾母细胞瘤细胞(SK - NEP - 1细胞系)
细胞别称:SKNEP1;肾母细胞瘤细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:儿童(原代肿瘤组织来源,性别信息未公开)
组织来源:肾母细胞瘤组织
生长特性:贴壁生长(可形成疏松单层)
细胞形态:多角形或圆形,核质比高
细胞代数:P15 - P25(推荐使用代数范围)
细胞规格:1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640(含10% FBS+1%青霉素 - 链霉素)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:血清冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(与传代密度相关)
供应限制:仅供肿瘤机制研究,不可用于临床或生物制药
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬接种
培养瓶:酒精消毒后直接置于CO₂培养箱
传代标准:细胞融合度达70% - 80%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:5(推荐密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
37℃消化3 - 5分钟,离心后完全去除消化酶
注意事项:
避免细胞过度融合(可能诱发自发分化)
定期检测支原体污染
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:完全培养基+10% DMSO
细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
对数生长期收集细胞
程序降温:4℃ 30min → - 80℃过夜 → 液氮储存
复苏验证:
复苏后48小时存活率≥85%(台盼蓝检测)
功能验证:软琼脂克隆形成实验(维持致瘤特性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度异常导致细胞死亡(需提供温度记录)
2. 到货72小时内证实微生物污染
3. STR分型与原库数据不符
不予重发情形:
1. 未按要求进行细胞适应性培养
2. 使用非标准培养基导致形态异常
3. 未执行推荐传代频率引发的细胞老化
4. 未进行细胞身份鉴定直接开展实验
(注:本简介基于公开文献数据编制,具体操作建议以细胞库最新指南为准)