一、细胞基本属性
- 细胞名称：SK - N - BE(2)人神经母细胞瘤细胞
- 细胞别称：BE(2)-C；神经母细胞瘤细胞系
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 疾病背景：源自神经母细胞瘤患者骨髓转移灶（临床病理确诊）
- 组织来源：神经母细胞瘤组织（骨髓转移灶分离）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白或纤维连接蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：不规则多边形或梭形，聚集成簇，胞质透亮
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数，确保表型稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI 1640（含10%FBS + 1%非必需氨基酸+1%丙酮酸钠）
- 培养条件：气相：5%CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10%DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖培养密度及传代处理）
- 供应限制：仅限科学研究，不可用于临床、药物开发或生物医学产品
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精擦拭表面，静置培养箱4小时适应
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（贴壁紧密时需及时传代）
- 传代比例：1:3至1:4（建议接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%Trypsin - EDTA（含0.02%EDTA）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项：
- 消化后需完全中和胰酶（残留酶影响贴壁）
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10%DMSO + 90%培养基）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，轻柔重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮长期储存
- 复苏验证：
- 复苏存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：N - MYC基因表达检测（维持肿瘤特性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 1.运输温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 2.到货72小时内证实细菌/真菌污染（需提供污染检测证据）
- 3.STR位点匹配率＜90%（需第三方检测报告）
- 不予重发情形：
- 1.未按规范进行预包被培养器皿导致贴壁失败
- 2.使用含高浓度抗生素的培养基干扰细胞状态
- 3.未定期进行支原体检测引发交叉污染
- 4.细胞培养超过推荐代数导致表型漂移
（注：操作需符合生物安全规范，建议定期进行神经突触标志物β - III Tubulin及GD2表达检测以确认细胞特性）
