一、细胞基本属性
细胞名称:SK - MEL - 2人皮肤黑色素瘤细胞
细胞别称:SK - MEL - 2细胞;皮肤黑色素瘤细胞;恶性黑色素瘤细胞系
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成人(具体供体信息不详,源自皮肤黑色素瘤组织)
组织来源:皮肤黑色素瘤组织(原发灶)
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:上皮样,多角形,胞质丰富,核仁明显
细胞代数:P5 - P15(建议使用中低代次以维持表型稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS + 1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~36 - 48小时(依赖培养密度与血清浓度)
供应限制:仅限科学研究,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基;培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱4小时待细胞贴壁
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA);37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:避免长时间消化(防止细胞聚集成团);传代后48小时内避免频繁观察(减少环境扰动)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:离心收集细胞,轻柔重悬于预冷冻存液;程序降温:4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮长期保存
复苏验证:复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥85%);功能验证:体外侵袭实验(Matrigel模型验证转移潜能)
四、售后服务承诺
重发标准:1. 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录);2. 到货7天内证实交叉污染(需STR鉴定报告);3. 复苏后存活率低于80%(提供染色检测证据);4. 细胞形态与描述严重不符(提供显微照片)
不予重发情形:1. 未使用推荐包被材料导致贴壁失败;2. 擅自更改培养基成分影响增殖速率;3. 未按规范进行细胞传代引发老化;4. 液氮保存设备故障导致冻存管破裂