一、细胞基本属性
细胞名称为SK - MEL - 1人皮肤黑色素瘤细胞,别称SK - MEL - 1细胞、黑色素瘤细胞系,种属来源是人,源于皮肤转移性黑色素瘤组织,组织来源是皮肤黑色素瘤组织,生长特性为贴壁生长(可形成疏松单层或悬浮细胞团),细胞形态有多形性特征,呈现上皮样或纺锤形混合形态,细胞代数为P4 - P10(推荐使用代数以确保功能稳定性),细胞规格为1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液),培养基为RPMI 1640培养基(含10% FBS+1%双抗),培养条件为气相5% CO₂、温度37℃、湿度95%,冻存条件为无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存,倍增时间约48 - 72小时(与培养基批次及接种密度相关),供应限制为仅限于科学研究,不可用于临床治疗或生物医药商业开发。
二、细胞培养操作指南
收货处理为冻存管37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基,培养瓶酒精消毒表面,静置培养箱4小时后观察贴壁情况。传代标准为细胞密度达80% - 90%(贴壁细胞)或悬浮细胞密度达1×10⁶ cells/mL,传代比例为1:3至1:5(贴壁细胞推荐密度2×10⁴ cells/cm²),消化方法为使用0.25% Trypsin - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺),37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落。注意事项为悬浮细胞团需轻柔吹散(避免机械损伤),换液时保留部分原培养基以维持代谢适应性。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方为无血清冻存液(含10% DMSO+90% FBS),细胞密度为冻存浓度5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL,冻存步骤为对数生长期收集细胞,离心后重悬于冻存液,程序降温为4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮长期保存,复苏验证为复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥85%),功能验证为黑色素合成能力检测(L - DOPA氧化法)。
四、售后服务承诺
重发标准为运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录),5个工作日内证实支原体污染(需提供第三方检测报告),细胞STR位点与ATCC数据库不匹配,复苏后活率低于80%(需提供台盼蓝染色图片)。不予重发情形为客户未按说明书进行预培养直接冻存,使用非指定培养基导致细胞形态异常,培养环境污染引发的细胞状态问题,超过建议代数(P10)后出现的功能衰退。