一、细胞基本属性
细胞名称:SK - BR - 3+LUC人乳腺癌细胞(荧光素酶标记株)
细胞别称:SKBR3 - LUC细胞;HER2阳性乳腺癌细胞;人乳腺腺癌细胞 - LUC
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年女性(供体原代肿瘤组织来源,病理分型为腺癌)
组织来源:转移性胸腔积液(ATCC来源细胞株经慢病毒转染荧光素酶基因)
生长特性:贴壁生长(依赖细胞间连接,需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:不规则多边形,细胞边缘可见伪足状突起,融合后呈铺路石样排列
细胞代数:P5 - P15(建议使用P8 - P12代次以维持荧光素酶稳定表达)
细胞规格:1×10^6 cells/T75培养瓶或1.2mL冻存管(含血清型冻存液)
培养基:McCoy’s 5A改良培养基(含10% FBS+1%双抗+100μg/mL潮霉素B)
培养条件:恒温37℃、5% CO₂环境,建议每48小时更换培养基
冻存条件:程序降温冻存液(含55%基础培养基+30% FBS+15% DMSO),液氮气相长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与HER2表达水平相关)
特殊标记:稳定表达荧光素酶(需每两周进行潮霉素加压维持)
供应限制:仅供肿瘤机制研究及活体成像实验,不可用于基因治疗或商业用途
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管需37℃水浴复苏后离心去除冻存液,使用预温培养基重悬接种
传代标准:融合度达80% - 85%时传代(高密度易诱发细胞团漂浮)
传代比例:1:3至1:5(建议接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:0.25%胰酶 - EDTA消化3 - 5分钟,加入含血清培养基终止
荧光维持:传代后补充潮霉素B(终浓度100μg/mL),定期检测荧光素酶活性
注意事项:避免反复传代导致HER2表达衰减,建议每3代进行流式细胞术验证
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:基础培养基:血清:DMSO = 5:4:1(含潮霉素B 50μg/mL)
细胞密度:推荐2×10^6 cells/mL(活率需≥95%)
冻存程序:细胞悬液分装至冻存管后,使用程序降温盒(-1℃/min)转移至液氮
复苏验证:台盼蓝染色活率>90%,复苏48小时后检测荧光素酶发光值(RLU需>1×10^5)
质控标准:每批次细胞提供STR鉴定报告及荧光素酶活性检测证书
四、售后服务承诺
质量保证:提供到货后72小时内免费复检服务(含支原体检测及活力验证)
重发条款:符合以下情形可申请重发:1.运输温度记录异常;2.到货活率<85%;3.STR匹配度<85%;4.荧光素酶本底发光值缺失
免责声明:以下情况不承担责任:1.未使用指定培养基导致基因沉默;2.潮霉素筛选间隔超过14天;3.机械吹打过度导致细胞膜损伤;4.未按规范进行定期支原体检测
本产品经ISO9001质量管理体系认证,配套提供细胞培养操作视频及荧光成像实验方案,技术支持时间为工作日9:00 - 18:00