一、细胞基本属性
- 细胞名称：SK - BR - 3人乳腺癌细胞
- 细胞别称：SKBR3；人乳腺癌细胞株
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：成年女性（原代供体为乳腺腺癌患者）
- 组织来源：乳腺腺癌组织转移灶（胸腔积液分离）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白或纤维连接蛋白包被）
- 细胞形态：上皮样，贴壁后呈不规则多角形，核质比高
- 细胞代数：P5 - P15（建议使用前10代以保证HER2表达稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管（含血清替代型冻存液）
- 培养基：McCoy's 5A培养基（含10% FBS + 1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：程序降温冻存液（含DMSO及血清替代物），液氮长期保存
- 倍增时间：约72 - 96小时（依赖培养基成分及传代密度）
- 供应限制：仅限科学研究，禁止临床治疗或生物医药生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速复苏，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒表面后直接置于CO₂培养箱平衡4小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每周传代1 - 2次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.1%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻柔拍打促进细胞脱落
- 注意事项：
- 避免过度消化导致细胞膜损伤
- 传代后48小时内避免频繁观察（减少物理扰动）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：血清替代型冻存液（含8% DMSO + 20% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化后离心收集细胞，缓慢滴加预冷冻存液混匀
- 程序降温：4℃ 1h → - 80℃ 24h → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时检测存活率（台盼蓝染色≥85%）
- 功能验证：HER2免疫荧光染色（P8代细胞应保持强阳性表达）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度记录异常导致细胞死亡（需提供物流温度曲线）
- 7日内经qPCR证实支原体污染（需提供完整检测数据）
- 细胞复苏后贴壁率低于70%（需提供明场显微照片）
- STR分型与ATCC数据库不匹配
- 不予重发情形：
- 客户未按标准流程进行胶原蛋白包被
- 使用其他培养基导致HER2表达丢失
- 细胞传代超过推荐代数引发的功能异常
- 未进行定期支原体检测造成的交叉污染
