一、细胞基本属性
- 细胞名称:SIHa人子宫颈鳞癌细胞
- 细胞别称:宫颈鳞癌细胞;子宫颈癌上皮细胞系
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:55岁女性(原代取自宫颈鳞癌组织)
- 组织来源:子宫颈鳞状细胞癌组织
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:上皮样多角形,融合后呈铺路石样紧密排列
- 细胞代数:P15 - P25(经STR鉴定确认遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO),液氮气相长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(与血清浓度相关)
- 供应限制:仅限体外研究,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴震荡解冻,加入5mL预热培养基离心去冻存液
- 培养瓶:酒精消毒外表面后直接置于CO₂培养箱平衡
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:3至1:6(推荐初始密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,显微镜下确认细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 避免消化过度导致细胞膜损伤
- 传代后需间隔12小时首次换液
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:基础培养基+20% FBS+10% DMSO
- 细胞密度:推荐冻存浓度5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集对数生长期细胞,缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃ 24小时 → 液氮长期存储
- 复苏验证:
- 复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:HPV18 E6/E7基因表达检测(qPCR法)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 干冰运输超时导致细胞活性丧失(需提供物流温度记录)
- 到货72小时内检测出支原体污染(需提供电镜或PCR报告)
- STR位点匹配率<80%(需第三方检测报告)
- 不予重发情形:
- 未使用原装培养基导致形态异常
- 擅自进行基因编辑后功能丧失
- 反复冻融超过3次造成细胞死亡
- 未按生物安全二级实验室标准操作