一、细胞基本属性
1. 细胞名称:人神经母细胞瘤细胞SH - SY5Y(转染野生型)
2. 细胞别称:SH - SY5Y细胞;神经母细胞瘤细胞系SY5Y
3. 种属来源:人(Homo sapiens)
4. 来源背景:源自骨髓转移灶的人神经母细胞瘤组织,经野生型基因转染稳定表达
5. 组织来源:神经母细胞瘤组织
6. 生长特性:贴壁生长(部分细胞可呈现轻微半悬浮状态)
7. 细胞形态:多形性,以梭形为主,偶见圆形或聚集成团
8. 细胞代数:P3 - P10(推荐使用P5 - P8代以保证功能稳定性)
9. 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
10. 培养基:DMEM/F12培养基(含10% FBS+1%非必需氨基酸+1%丙酮酸钠)
11. 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
13. 倍增时间:约24 - 48小时(依赖培养密度与传代处理)
14. 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗、药物开发或动物实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时
2. 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
3. 传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
4. 消化方法
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺平衡液)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落后终止消化
5. 注意事项
- 避免过度吹打(防止细胞膜损伤)
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90%培养基)
2. 细胞密度:冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
3. 冻存步骤
- 离心收集细胞,轻柔重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 转移至液氮长期保存
4. 复苏验证
- 复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:神经突触生长观察及MYCN基因表达检测
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 72小时内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
- 细胞复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝染色图像)
- STR分型与数据库记录不符
2. 不予重发情形
- 客户延迟复苏超过48小时
- 使用含抗生素培养基导致细胞活性异常
- 未按推荐传代比例导致增殖受阻
- 实验操作污染未及时反馈