一、细胞基本属性
细胞名称：转染突变型人神经母细胞瘤细胞（SH - SY5Y）
细胞别称：SH - SY5Y细胞；神经母细胞瘤细胞系
种属来源：人（Homo sapiens）
疾病背景：源自骨髓转移的神经母细胞瘤组织，经基因工程改造携带特定突变
组织来源：神经母细胞瘤组织（交感神经节来源）
生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白或明胶包被培养器皿）
细胞形态：不规则多角形或梭形，可分化出神经突样结构
细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数以保证表型稳定性）
细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含胎牛血清冻存液）
培养基：DMEM/F12培养基（含10% FBS+1%非必需氨基酸+1%丙酮酸钠）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：含10% DMSO的胎牛血清冻存液，-150℃以下长期保存
增殖特性：倍增时间约36 - 48小时（受转染基因表达水平影响）
应用范围：神经分化研究、肿瘤药物筛选、基因功能分析
供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
·冻存管复苏：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
·培养瓶处理：酒精消毒后静置培养箱4小时，待细胞贴壁后换液
传代标准：融合度达80% - 90%（高密度易诱发自发分化）
传代比例：1:3至1:6（推荐接种密度2×10⁴ cells/cm²）
消化方法：
·使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02%胶原酶）
·37℃消化3 - 5分钟，轻柔拍打促进细胞脱落
注意事项：
·分化诱导需控制血清浓度（建议低于2%）
·传代后12小时内避免频繁观察，减少机械扰动
·定期检测转染基因的稳定性（建议每5代进行PCR验证）
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：70%基础培养基+20% FBS+10% DMSO
细胞密度：冻存浓度1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL（高密度有利于复苏）
冻存步骤：
·离心收集细胞，缓慢滴加预冷冻存液混匀
·程序降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期存储
复苏验证：
·存活率≥85%（台盼蓝染色法）
·功能验证：神经突生长能力检测（48小时内应出现分支状突起）
·转染基因表达验证：Western Blot检测目标蛋白表达量
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程温度记录异常（需提供物流温度监控报告）
2. 到货72小时内证实微生物污染（需第三方检测报告）
3. 复苏存活率低于80%且操作符合规范
4. 转染基因序列与订单不符（需提供测序比对结果）
免责情形：
1. 未使用指定包被培养器皿导致贴壁失败
2. 擅自更改培养基配方影响细胞特性
3. 超过推荐代数导致基因表达沉默
4. 未按要求进行分化前预处理
