一、细胞基本属性
- 细胞名称：人神经母细胞瘤细胞（SH - SY5Y）
- 细胞别称：SH - SY5Y细胞；神经母细胞瘤细胞系
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 背景信息：源自1970年分离的转移性神经母细胞瘤组织，具有多巴胺能神经元分化潜能
- 组织来源：骨髓活检的神经母细胞瘤组织（4岁女性患者）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白或聚赖氨酸包被培养器皿）
- 细胞形态：不规则神经元样，常见突触样结构，高分化时呈现多极延伸
- 细胞代数：推荐使用P4 - P15代（维持神经标志物表达稳定性）
- 细胞规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12培养基（含10% FBS + 1%非必需氨基酸+ 1% GlutaMAX）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮气相长期保存
- 倍增时间：约36 - 48小时（受血清浓度及分化诱导条件影响）
- 应用领域：神经退行性疾病研究、神经毒性测试、肿瘤药敏实验
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴解冻后转移至15mL离心管，加5mL培养基离心去冻存液
- 培养瓶：酒精擦拭外表面，静置4小时后更换新鲜培养基
- 传代标准：融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:6（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.1%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，细胞边缘卷曲时立即终止
- 分化诱导：可选用视黄酸（10μM）连续处理7天诱导神经元分化
- 注意事项：
- 传代后24小时避免移动培养瓶防止未贴壁细胞脱落
- 定期检测NSE、β - III Tubulin等神经标志物表达
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 20% FBS +渗透保护剂）
- 冻存密度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化后离心收集细胞，轻柔重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30min → - 20℃ 2h → - 80℃ 12h →液氮储存
- 复苏验证：
- 存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：神经突长度测量（分化后突触延伸≥50μm）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 到货干冰完全挥发导致细胞死亡（需提供开箱视频）
- 72小时内证实支原体污染（需提供第三方检测报告）
- STR分型与数据库记录不符（需提供电泳图谱）
- 复苏后存活率＜85%（按规范操作验证）
- 免责条款：
- 客户延迟复苏超过48小时
- 擅自使用未经验证的分化诱导方案
- 未按要求进行胶原包被导致贴壁失败
- 超过推荐代次导致的遗传漂移
