一、细胞基本属性
细胞名称:SHP - 77人小细胞肺癌细胞
细胞别称:SHP - 77细胞;小细胞肺癌细胞系
种属来源:人(Homo sapiens)
疾病背景:源自小细胞肺癌患者肿瘤组织(经病理学确诊)
组织来源:肺肿瘤组织原代分离
生长特性:贴壁生长(需基质包被培养器皿)
细胞形态:多角形或梭形,单层排列,接触抑制后呈现致密集落
细胞代数:P5 - P15(建议使用中低代次以保证表型稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%青霉素/链霉素+2mM L - 谷氨酰胺)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存(-150℃以下)
倍增时间:约48 - 60小时(与培养基批次及接种密度相关)
应用限制:仅限体外科研实验,禁止临床治疗或转基因动物构建
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管:37℃水浴快速复苏,离心后重悬于预热培养基接种;培养瓶:酒精消毒外壁后静置培养箱平衡2小时,次日换液
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每周传代1 - 2次)
传代比例:1:3至1:4(推荐初始密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟,显微镜下确认细胞边缘收缩后终止
注意事项:消化终止需加入含血清培养基;传代后48小时内避免频繁观察扰动;定期检测支原体污染
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:基础培养基+20% FBS+10% DMSO
细胞密度:冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
冻存步骤:离心收集细胞,缓慢滴加冻存液重悬;分装至冻存管后使用程序降温盒(-1℃/min),-80℃过夜后转入液氮
复苏验证:存活率≥85%(台盼蓝染色法);功能验证需通过CCK - 8增殖曲线检测(P8代内增殖速率偏差≤15%)
四、售后服务承诺
重发标准:1. 运输温度记录异常导致细胞团块溶解(需提供物流温度监控截图);2. 到货72小时内经检测证实微生物污染(需提供第三方检测报告);3. 复苏后贴壁率低于70%(需提交接种后24小时显微照片);4. STR分型与数据库不匹配(需提供完整电泳图谱)
免责条款:1. 客户自行修改培养基配方导致的生长异常;2. 未按规范进行传代(如消化过度或接种密度过低);3. 液氮储存设备故障导致的细胞失活;4. 超过建议代次(P15)使用后的功能衰退