一、细胞基本属性
- 细胞名称:RWPE - 2人前列腺正常细胞
- 细胞别称:人前列腺上皮细胞;前列腺正常上皮细胞;RWPE2
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:成年男性(供体筛选无前列腺疾病史)
- 组织来源:前列腺组织(经永生化处理)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原包被培养器皿)
- 细胞形态:上皮样单层,接触抑制后呈铺路石样排列
- 细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数保证功能稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(无血清冻存体系)
- 培养基:Keratinocyte - SFM培养基(含EGF及垂体提取物添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含5% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约36 - 48小时(依赖传代密度及培养基批次)
- 供应限制:仅限基础研究,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱4小时待细胞贴壁
- 传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐初始密度2×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:
- 传代后需补充5ng/mL EGF维持增殖活性
- 避免频繁换液(每周2 - 3次,每次更换50%培养基)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:基础培养基+10% FBS+5% DMSO
- 细胞密度:冻存浓度1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温:4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮长期储存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率(标准≥85%)
- 功能验证:角蛋白18免疫荧光染色确认上皮特性
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度记录异常导致细胞失活
- 到货72小时内经PCR证实支原体污染
- 复苏后活率低于80%(需提供台盼蓝染色视频)
- 永生化标志物检测与申报不符
- 不予重发情形:
- 使用非指定胶原包被培养器皿
- 未按时更换培养基导致细胞分化
- 超过推荐代数继续扩增引发遗传变异
- 未执行标准EGF浓度补充操作