一、细胞基本属性
细胞名称:RWPE-1人前列腺正常细胞
细胞别称:RWPE-1细胞;人前列腺上皮细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成年男性(供体无前列腺疾病史)
组织来源:正常前列腺组织
生长特性:贴壁生长(依赖角质细胞无血清培养基)
细胞形态:典型上皮样单层,接触抑制后呈铺路石状排列
细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数确保功能稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:角质细胞无血清培养基(KSFM,含表皮生长因子及牛垂体提取物)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无蛋白冻存液(含5% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(受细胞密度及培养基批次影响)
供应限制:仅用于基础研究,禁止应用于临床治疗或转基因实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速复苏,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:表面消毒后直接置入CO₂培养箱平衡
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3天观察一次)
传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,显微镜下确认细胞边缘卷曲后终止
注意事项:
- 避免消化过度损伤细胞表面受体
- 传代后12小时需补加新鲜生长因子
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:专用无血清冻存液(含牛血清白蛋白替代物)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 预冷冻存管至4℃后分装细胞悬液
- 程序降温:4℃ 30min → -80℃ 24h → 液氮永久保存
复苏验证:
- 复苏后48小时进行活力检测(台盼蓝拒染率≥90%)
- 功能验证:细胞角蛋白免疫荧光染色确认上皮特性
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度记录异常导致细胞团块解体
2. 到货72小时内证实真菌污染
3. 细胞贴壁率低于85%(需提供显微影像)
4. 基因表达谱与ATCC标准不一致
不予重发情形:
1. 解冻后未及时更换专用培养基
2. 自行添加血清改变培养体系
3. 未使用推荐基质胶进行铺板
4. 超过建议代数仍继续传代使用
注:本产品需配合前列腺上皮细胞专用培养体系使用,常规内皮细胞培养基可能导致分化异常