一、细胞基本属性
- 细胞名称:RKO人结肠腺癌细胞
- 细胞别称:RKO细胞;结肠腺癌细胞;结直肠腺癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:结肠腺癌组织
- 生长特性:贴壁生长(需基质支持)
- 细胞形态:上皮样,贴壁后呈多角形或梭形,核质比高
- 细胞代数:P3 - P10(推荐使用代数内功能稳定性最佳)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:~24 - 36小时(依赖培养密度与传代条件)
- 供应限制:仅限科学研究,不可用于临床或动物体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒外壁,静置培养箱平衡4小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:6(依据实验需求调整接种密度)
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA,37℃消化2 - 3分钟
- 终止消化后轻柔吹打至单细胞悬液
- 注意事项
- 避免消化过度(影响细胞贴壁能力)
- 传代后6小时内避免移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90% FBS)
- 冻存密度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞,重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮保存
- 复苏验证
- 复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色确认)
- 功能验证:CCK - 8检测增殖活性(P5代内应保持稳定)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 收到后48小时内证实微生物污染(需提供检测证据)
- 复苏存活率低于85%(规范操作前提下)
- STR谱系鉴定与数据库不匹配
- 不予重发情形
- 未按说明书进行复苏或传代操作
- 使用非推荐培养基或添加剂
- 液氮保存设备故障导致细胞失活
- 未留存污染检测原始数据而申请重发
(注:以上内容基于标准操作流程,具体实验条件需根据研究目的优化调整。)