一、细胞基本属性
细胞名称
RPMI8226人骨髓瘤细胞
细胞别称
人多发性骨髓瘤细胞;RPMI 8226;骨髓瘤细胞系
种属来源
人(Homo sapiens)
疾病背景
源自多发性骨髓瘤患者外周血,具有浆细胞恶性增殖特性
组织来源
骨髓(B淋巴细胞谱系)
生长特性
悬浮生长(聚集成团或单细胞形式)
细胞形态
圆形或类圆形,胞体透亮,悬浮状态下呈簇状聚集
细胞代数
推荐使用P5 - P15代(维持基因组稳定性与增殖活性)
细胞规格
1×10^6 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件
气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
约24 - 48小时(依赖培养密度与营养条件)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
• 悬浮细胞瓶:直接转移至培养瓶,补足培养基至推荐体积
传代标准
细胞密度达1×10^6 cells/mL(建议每2 - 3天传代)
传代比例
1:3至1:5(维持密度在2×10^5 - 8×10^5 cells/mL)
操作流程
• 离心收集细胞(150×g,5分钟)
• 弃上清后轻柔重悬于新鲜培养基
注意事项
• 避免高速离心导致细胞膜损伤
• 定期检测培养基pH值(悬浮细胞代谢较快)
• 传代时保留部分旧培养基以维持细胞适应性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
细胞密度
推荐冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤
• 离心收集对数生长期细胞,重悬于预冷冻存液
• 分装至冻存管后立即进行程序降温:4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮长期保存
复苏验证
• 复苏后活率≥90%(台盼蓝染色法)
• 功能验证:CCK - 8法检测增殖曲线(P8代细胞应保持指数增长趋势)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程中干冰耗尽导致细胞死亡(需提供温度记录证明)
2. 到货72小时内证实支原体污染(需提供检测报告)
3. 复苏活率低于85%(经第三方检测确认)
4. STR分型与数据库不匹配
不予重发情形
1. 未按说明书进行离心操作导致细胞丢失
2. 使用非推荐培养基或添加未经验证的生长因子
3. 细胞培养超过推荐代次(P15)后出现异常
4. 未定期进行支原体检测导致污染扩散