一、细胞基本属性
- 细胞名称:RL95 - 2人子宫内膜癌细胞
- 细胞别称:RL - 95 - 2;人子宫内膜腺癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:64岁女性(供体患有子宫内膜腺癌)
- 组织来源:子宫内膜癌组织
- 生长特性:贴壁生长(需依赖细胞外基质支撑)
- 细胞形态:不规则多角形或梭形,成簇贴壁生长
- 细胞代数:P5 - P10(推荐使用代数以确保功能稳定性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12培养基(含10% FBS + 0.005 mg/mL胰岛素+1% NEAA)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约50 - 60小时(依赖培养密度及传代处理)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或商业用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒后置于37℃培养箱平衡2小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每3 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项
- 避免消化过度导致细胞膜损伤
- 首次换液需在传代后48小时内完成
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后缓慢混合冻存液
- 梯度降温程序:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后48小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:细胞迁移实验(P5代细胞应保持典型癌性迁移特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活(需提供温度记录证明)
- 到货3日内经检测证实支原体污染(需提供第三方检测报告)
- 复苏后存活率低于85%(按规范操作验证)
- STR基因分型与数据库不匹配
- 不予重发情形
- 收货后未及时处理导致细胞死亡(超过24小时未复苏)
- 使用非指定培养基或血清导致功能异常
- 实验操作不当(如反复冻融或污染)
- 未按规范进行细胞鉴定直接用于实验